商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | hFOB1.19人SV40轉(zhuǎn)染成骨細胞細胞系 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6251 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁細胞 | 細胞形態(tài) | 多細胞形態(tài) |
商品詳情：
別稱 hFOB1.19; hFOB
種屬 人類
年齡（性別） 胎兒
組織來源 骨；成骨細胞；以SV40巨細胞抗原轉(zhuǎn)染
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 多細胞形態(tài)
背景描述 hFOB 1.19細胞是在0.6mg/mL新霉G418存在下，用溫度敏感的表達載體pUCSVisA58轉(zhuǎn)染自然流產(chǎn)的胎兒四肢組織建立的細胞系。在許可溫度33.5℃下細胞分裂很快，而在限制溫度39.5℃下細胞極少分裂或不分裂。hFOB 1.19細胞具有分化為表達造骨細胞表型的成熟造骨細胞的能力；hFOB 1.19細胞提供了一個同質(zhì)化的快速增殖模型系統(tǒng)，用于研究正常人造骨細胞的分化、造骨細胞生理和激素、生長因子和對造骨細胞的功能及分化有影響的細胞因子。
生物安全等級 2 [Cells contain SV40 viral sequences]
生長培養(yǎng)基 DMEM/F12＋0.3mg/ml G418＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：34℃
抗原表達情況 SV40 T antigen
基因表達情況 alkaline phosphatase
注意事項 該細胞培養(yǎng)難度較高；培養(yǎng)溫度為度：33.5℃-34℃；培養(yǎng)基中添加G418。
保藏機構(gòu) ATCC; CRL-11372
細胞系培養(yǎng)步驟：
細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復(fù)蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復(fù)蘇?：
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代?：
當(dāng)細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
?細胞凍存?：
當(dāng)細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學(xué)研究提供了大量的細胞樣本?。
?細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復(fù)蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復(fù)蘇?：
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代?：
當(dāng)細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞凍存?：
當(dāng)細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學(xué)研究提供了大量的細胞樣本?
細胞接收后的處理：
1）hFOB1.19人SV40轉(zhuǎn)染成骨細胞細胞系收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備MEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔脂肪間充質(zhì)干細胞 | ID8小鼠卵巢上皮癌細胞 |
小鼠單核細胞 | MH-S小鼠肺泡巨噬細胞 |
小鼠腎足細胞 | RAW 264.7+GFP小鼠單核巨噬細胞白血病細胞+GFP |
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