實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
棕果蝠皮膚成纖維細(xì)胞；FFBS3 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63742 |
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細(xì)胞名稱 棕果蝠皮膚成纖維細(xì)胞；FFBS3
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞系來(lái)源于一雄性棕果蝠的耳部皮膚組織。2005年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS
傳代方法: 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況: P3
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 熒光法（-）
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Cryptomerin B
CAS No.：22012-98-2
中文名：
分子式：C32H22O10
棉籽糖 訂購(gòu)|咨詢 嵌合蛋白1(CHN1) 規(guī)格： 20mg
三七 訂購(gòu)|咨詢 嵌合蛋白2(CHN2) 規(guī)格： 1g
D木糖 訂購(gòu)|咨詢 嵌套蛋白(NES) 規(guī)格： 20mg
次 訂購(gòu)|咨詢 黑色素A(MLANA) 規(guī)格： 20mg
白頭翁素 訂購(gòu)|咨詢 黑色素聚集激素受體1(MCHR1) 規(guī)格： 10mg
異李素3O新 訂購(gòu)|咨詢 黑色素瘤優(yōu)先表達(dá)抗原(PRAME) 規(guī)格： 20mg
大觀 訂購(gòu)|咨詢 黑色素瘤關(guān)聯(lián)ME20(ME20M) 規(guī)格： 200mg
N，N二 訂購(gòu)|咨詢 黑色素瘤抗原家族A1(MAGEA1) 規(guī)格： 0.2ml
胱 訂購(gòu)|咨詢 黑素皮質(zhì)激素3受體(MC3R) 規(guī)格： 100mg/支
木瓜（貼梗棠） 訂購(gòu)|咨詢 黑素皮質(zhì)激素4受體(MC4R) 規(guī)格： 1g
三腺苷二 訂購(gòu)|咨詢 黑素皮質(zhì)激素5受體(MC5R) 規(guī)格： 10mg
士 訂購(gòu)|咨詢 黑素曲菌素(MREG) 規(guī)格： 100mg
琥紅 訂購(gòu)|咨詢 黑素轉(zhuǎn)鐵蛋白(MFI2) 規(guī)格： 200mg
羅布葉 訂購(gòu)|咨詢 黑素親和素(MLPH) 規(guī)格： 5g
雞冠花 訂購(gòu)|咨詢 黑素瘤抑制性活性蛋白1(MIA1) 規(guī)格： 2g
哥倫比亞瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基 訂購(gòu)|咨詢 黑素瘤抑制性活性蛋白1(MIA1) 規(guī)格： 13.2g/300ml
茵陳(濱蒿) 訂購(gòu)|咨詢 黑素瘤細(xì)胞黏附分子(MCAM) 規(guī)格： 1.5g
地芬多 訂購(gòu)|咨詢 黑素瘤細(xì)胞黏附分子(MCAM) 規(guī)格： 100mg
CTNNBL1/Beta catenin like 1 β連環(huán)蛋白樣蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Jujuboside B1
DATF1 死亡相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Prosapogenin A
TFDP2/DP2 轉(zhuǎn)錄因子E2F二聚體蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml ACY1215
EAF2 睪調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)和腫瘤抑制基因抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Myristic acid
FLI1 尤文肉瘤FLI1蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Myristic acid
MDMX MDM2樣P53蛋白結(jié)合抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Dimethylglyoxime
TMUB1 跨膜和泛素樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Flavone
NUP50 核孔蛋白50抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ivermectin
增靈 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Calciumperoxide 含量:AR，99%
粘蛋白 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Mucin 含量:BR，200u/g
粘膠質(zhì) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Pectin 含量:試劑級(jí)，98%
粘膠質(zhì)酶 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Pectinase 含量:生物技術(shù)級(jí)，30u/mg
粘液素II 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Mucin 含量:BR，200u/mg
樟腦磺 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:L()Camphorsulfonicacid 含量:AR，99%
長(zhǎng)春新物 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:VCR 含量:USP級(jí)，88%，920u/mg
鍺 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Germanium 含量:AR，99.5%
鍺試劑 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Phenylfluorone 含量:高純，65%
蔗糖酶 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:SucrosePhosphorylase 含量:超純，99%
棕果蝠皮膚成纖維細(xì)胞；FFBS3木糖賴氨脫氧膽鹽瓊脂規(guī)格：250g用途：用于藥品或生物制品中沙門(mén)氏菌選擇分離培養(yǎng)
10%NaCl胰胨水規(guī)格：20支詳情介紹
多粘菌素E規(guī)格：1g用途：用于抑制革蘭氏陰性菌生長(zhǎng)
雙歧桿菌BS培養(yǎng)基（不含瓊脂）規(guī)格：250g用途：用于雙歧桿菌增菌培養(yǎng)
平板計(jì)數(shù)瓊脂平板（9cm）Plate Count Agar規(guī)格：10個(gè)/包用途：標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)瓊脂，含糖，用于細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定
四環(huán)素檢定瓊脂規(guī)格：250g用途：用于四環(huán)素殘留的微生物學(xué)檢定(SN標(biāo)準(zhǔn))
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