綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
（1）前期準(zhǔn)備：（A）滅菌處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設(shè)備和材料；
（2）按比例配制培養(yǎng)材料；
（3）導(dǎo)入曝氣，進(jìn)行繁殖培養(yǎng)；
（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yǎng)；
（5）分離并檢測；
（6）取液儲(chǔ)存；通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強(qiáng)，培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi)，菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變，且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
蛹蟲草(北冬蟲夏草，北蟲草)（斜面）說明書 | Cordyceps | EY-J963676 |
資源名稱: 蛹蟲草(北冬蟲夏草，北蟲草)（斜面）
種屬: Cordyceps militaris
提供形式: 斜面培養(yǎng)物，凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 研究；。保健、藥用，適合液體發(fā)酵菌絲體。
培養(yǎng)基: 綜合PDA瓊脂：馬鈴薯提取液 1.0L，葡萄糖 20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O 1.5g，1 微量，瓊脂 15.0g，pH6.0。
生長條件: 25℃，好氧
生長特性: 15天長滿斜面，菌絲潔白、濃密、豐厚、菌絲絨毛狀。液體深層發(fā)酵溫度23-25℃，pH值為5.5-7，發(fā)酵周期3-4天。
存儲(chǔ)條件: 2-8℃。液氮超低溫凍結(jié)法；定期移植法
低溫存法:
①簡單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng)：
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶兩級(jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。
Bacillus│pocheonensis 中文名稱：抱川芽孢桿菌Bacillus│pocheonensis分離基物:樣/上層海提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在石油烴類降解菌/生物活性物質(zhì)篩選培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:472生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%
Stappia│slulata 中文名稱：星形斯塔普氏菌Stappia│slulata分離基物:樣/上層海提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在石油烴類降解菌/生物活性物質(zhì)篩選培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:472生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：95%,含碳穩(wěn)定劑
Marinomonas│communis 中文名稱：普遍海單胞菌Marinomonas│communis分離基物:樣/表層海提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在石油烴類降解菌/生物活性物質(zhì)篩選培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:472生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：95%,含碳穩(wěn)定劑
Aurantimonas│sp. 中文名稱：橙色單胞菌Aurantimonas│sp.分離基物:樣/表層海提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:石油烴類降解菌/海洋污染物生物修復(fù)/生物活性物質(zhì)篩選培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:472生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：95%,含碳穩(wěn)定劑
Brucella│sp. 中文名稱：布魯氏桿菌Brucella│sp.分離基物:沉積物/近海沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:1001生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%
Streptomyces│spinoverrucosus 中文名稱：疣鏈霉菌Streptomyces│spinoverrucosus分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:生物活性微生物/抗腫瘤活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%
Streptomyces│gougerotii 中文名稱：古熱羅氏鏈霉菌Streptomyces│gougerotii分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:生物活性微生物/抗腫瘤活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%
Streptomyces│atrovirens 中文名稱：暗黑微綠鏈霉菌Streptomyces│atrovirens分離基物:土壤/近海紅樹林土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:可用于抗菌活性及抗腫瘤活性研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%
蛹蟲草(北冬蟲夏草，北蟲草)（斜面）說明書ROS/c ros 活性氧簇ROS抗體甘草查爾BN-Boc-N'-Cbz-L-賴氨Mouse TPS (Tryptase) ELISA Kit
RPS6 S6核糖體蛋白抗體甘草查爾CN-Boc-L-賴氨甲酯鹽鹽Mouse MMP-10 (Matrix Metalloproteinase 10) ELISA Kit
Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236) 磷化S6核糖體蛋白抗體蓮心高鹽三異叉基膦Mouse MMP-12 (Matrix Metalloproteinase 12) ELISA Kit
Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) 磷化S6核糖體蛋白抗體蓮心雙十烷基二甲基Mouse MMP-13 (Matrix Metalloproteinase 13) ELISA Kit
Rb/P105 RB 成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤抑癌蛋白抗體芳樟雙十烷基二甲基Mouse sICAM-1/CD54 (Soluble Intercellular Adhesion Molecule 1) ELISA Kit
phospho-Rb/p105-Rb(Ser780) 磷化成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤抑癌蛋白抗體木蘭花2--6-基芐胺Mouse ANG (Angiogenin) ELISA Kit
RRAD RRAD抗體甲基2--6-基芐胺Mouse ACTH (Adrencocorticotropic Hormone) ELISA Kit
Rsk2/MAPKAP Kinase 1b 核糖體S6激酶RSK2抗體甲基原2--6-基芐胺Mouse OPG (Osteoprotegerin) ELISA Kit
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